DB45∕T 2866-2024 灵芝菌种制备技术规程(广西壮族自治区)
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文件大小(MB)： |
0.28 |
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10 |
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日期： |
2024/9/20 |
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ICS ICS ICS,65.020.99 65.020.99,CCS CCS CCS,B 39 45,广西壮族自治区地方标准,DB45/T 2866—2024,灵芝菌种制备技术规程,Technical code of practice for preparation of Ganoderma strain,2024 - 06 - 28发布,2024 - 08 - 01实施,广西壮族自治区市场监督管理局 发布,DB45/T 2866—2024,I,目次,前言 ...II,1 范围 .. 1,2 规范性引用文件 ...1,3 术语和定义 .. 1,4 菌种生产 ...1,4.1 品种及菌种的选择 .1,4.2 菌种制备环境 .. 1,4.3 设施设备 ..1,5 母种制作 ...2,5.1 培养基 .. 2,5.2 容器要求 ..2,5.3 培养基分装及灭菌 .2,5.4 菌种扩繁 ..2,5.5 母种要求及入库 ..2,6 原种和栽培种生产 .. 3,6.1 容器要求 ..3,6.2 培养基制作 ...3,6.3 灭菌 ...3,6.4 接种 ...3,6.5 培养 ...3,6.6 原种、栽培种要求及入库 .3,7 菌种检验 ...4,7.1 杂菌检验 ..4,7.2 害虫检验 ..5,8 生产档案 ...5,附录A （资料性） 常用培养基及配方 . 6,A.1 母种培养基 ...6,A.2 原种、栽培种培养基 ..6,A.3 检验培养基 ...6,DB45/T 2866—2024,II,前言,本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草,请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任,本文件由广西壮族自治区农业农村厅提出、归口并宣贯,本文件起草单位：广西壮族自治区农业科学院,本文件主要起草人：王灿琴、韦娇君、胡秀月、韦仕岩、王晓国、蓝桃菊、罗阳兰、吴圣进、,陈雪凤,DB45/T 2866—2024,1,灵芝菌种制备技术规程,1 范围,本文件确立了灵芝菌种制备的程序，规定了菌种生产、母种制作、原种和栽培种生产、菌种检验等阶段的操作指示，描述了描述了制备过程信息的追溯方法,本文件适用于广西行政区域内紫芝、赤芝等菌种的制备,2 规范性引用文件,下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件,GB 4806.7 食品安全国家标准 食品接触用塑料材料及制品,GB 5749 生活饮用水卫生标准,GB/T 12728 食用菌术语,NY/T 528 食用菌菌种生产技术规程,NY/T 1731 食用菌菌种良好作业规范,NY/T 1742 食用菌菌种通用技术要求,3 术语和定义,GB/T 12728界定的术语和定义适用于本文件,4 菌种生产,4.1 品种及菌种的选择,应选择出芝整齐、抗逆性强、产量高且稳定的品种，菌种应从具有资质的供种单位购买，其质量应符合NY/T 1742的规定,4.2 菌种制备环境,应符合NY/T 528的规定,4.3 设施设备,主要设施包括搅拌室、配料室、灭菌室、冷却室、接种室、培养室（通风、可控温）。主要设备包括电子秤、搅拌机、装袋机、高压灭菌锅、超净工作台或接种箱、空调机、除湿机、培养架、恒温培养箱、冰箱、显微镜等,DB45/T 2866—2024,2,5 母种制作,5.1 培养基,参见附录A,5.2 容器要求,母种选用试管作为容器，规格为18 mm×180 mm或者20 mm×200 mm；组织分离或纯化选用培养皿，规格直径为90 mm或60 mm,5.3 培养基分装及灭菌,5.3.1 培养基试管分装及灭菌,分装培养基至试管的1/5～1/4，用硅胶塞封口，顶端胶塞长40 mm～50 mm。每5支试管扎成一捆，用消毒过的牛皮纸包住胶塞一头，用橡皮筋扎紧，胶塞一头朝上放入灭菌锅，在121.5 ℃～123 ℃(0.11 MPa～0.12 Mpa)下灭菌25 min。灭菌后温度降至60 ℃左右摆斜面，斜面长度不超过试管长度的2/3，待培养基凝固并冷却后装进无菌聚丙烯袋备用,5.3.2 培养基灭菌及培养皿分装,培养基装入300 mL～500 mL三角瓶刻度的1/2处，用硅胶塞封口，在121.5 ℃～123 ℃(0.11 MPa～0.12 Mpa)下灭菌25 min，待温度降至60 ℃左右，在超净工作台上将三角瓶里的培养基倒入无菌的玻璃或塑料培养皿内，倒入培养基的量占培养皿高度的1/3,5.4 菌种扩繁,组织块培养4 d～5 d，长出20 mm左右的白色菌丝，挑取健壮、洁白、均匀、整齐的前端约3 mm～4 mm的菌落，移接到PDA综合培养基试管斜面，于28 ℃恒温培养7 d～8 d，选菌丝健壮、洁白、均匀、整齐的试管斜面做为母种保存,5.5 母种要求及入库,5.5.1 母种要求,母种在25 ℃～30 ℃下培养，6 d～8 d长满斜面，其它要求见表1,表,1 母种要求,项目,要求,容器,完整、无破损、无裂纹、洁净,棉塞或硅胶塞,干燥、整洁、松紧适度、能满足透气和过滤要求,接种量（菌种块大小）,(3 mm～5 mm)×(3 mm～5 mm),菌丝生长量,长满培养基表面,菌丝体特征,洁白、色泽一致、均匀健壮、舒展、浓密，无角变，无抑制拮抗线,菌丝分泌物,无,菌落边缘,整齐,杂菌菌落,无,气味,具有菌种特有的清香味，无酸、臭、霉等异味,DB45/T 2866—202……
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